Fundamento teórico:

Tricrómico de Van Gieson es una tinción especial que tiñe las fibras de colágeno del tejido conjuntivo. Asocia a una tinción nuclear producida por la hematoxilina férrica de Weigert, la tinción citoplasmática, efectuada por el ácido pícrico, y la tinción diferencial de colágeno del tejido conjuntivo por medio de la fucsina ácida. 

• Fucsina ácida: es un colorante aniónico que interactúa con los grupos amino del citoplasma, el grupo hemo de la sangre (Fe2+) y el músculo de los tejidos, mediante una interacción electrostática entre los aniones de la fucsina y los cationes de los componentes básicos y/o proteicos de los citoplasmas, sangre y músculos. Por tanto, tiñe los músculos, eritrocitos y citoplasmas celulares de color rojo.

• Hematoxilina férrica de Weigert: se trata de un colorante básico catiónico, que utiliza hierro como mordiente. Se une a las estructuras ácidas aniónicas de los ácidos nucleicos en la cromatina de las células. Se forma un complejo hematoxilina-hierro que actúa de colorante. Generalmente la hematoxilina se une fuertemente a los grupos fosfato del ADN y es resistente a la decoloración por ácidos; una cualidad beneficiosa ya que se utiliza posteriormente ácido pícrico. La hematoxilina férrica de Weigert tiñe los núcleos de color azul intenso o negro.

• Ácido pícrico: es un colorante ácido fuerte con una alta afinidad con el tejido conjuntivo. Desplaza la fucsina ácida y tiñe el colágeno de un color amarillento. Penetra fácilmente en el colágeno, ya que es una estructura porosa y muy rica en cargas. 

Esta tinción es útil para visualizar tejido conjuntivo, por lo que clínicamente, es eficiente para: 

• Detectar tejido cicatrizal: en los casos de fibrosis en el útero o el hígado, infartos, roturas de tendones y ligamentos, fibrosis pulmonar… utilizada sobre todo para valorar el daño ocasionado por la lesión o patología.
• Identificar patologías cardíacas como el mencionado infarto. 
• Identificar y evaluar tumores con abundante tejido fibroso. 
• Realizar el diagnóstico diferencial histológico.

Materiales:

• EPIs
• Cubetas de tinción
• Cestillas de tinción
• Alcoholes (100º – 96º – 80º – 70º – 50º)
• Xilol
• Agua destilada
• Agua corriente
• Gradillas
• Medio de montaje DPX
• Pipeta de vidrio y su pera
• Cubreobjetos
• Kit Tricrómico de Van Gieson (reactivo A, B y C).

Equipos:

• Campana de flujo laminar.

Protocolo:

1. Desparafinar y rehidratar. 
2. Colocar los portaobjetos con muestra en una gradilla.
3. Poner la misma cantidad de reactivo A y B sobre la muestra, se deja actuar 10 minutos.
4. Lavar en una cubeta con agua corriente, durante 10 minutos.
5. Cubrir con el reactivo C, se deja actuar durante 10 minutos.
6. Lavar en agua destilada, 2 inmersiones.
7. Sumergir en etanol 70º, 30 segundos.
8. Sumergir en etanol 96º, 30 segundos.
9. Sumergir en etanol 100º, 1 minuto.
10. Sumergir en xilol durante 15 minutos.
11. Montar en la campana con el medio de montaje.
12. Observar bajo el microscopio.

Resultados e imágenes